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Caracterização molecular, expressão gênica e atividade enzimática tecidoespecíficas das proteínas PAL e CAD durante a formação de madeira em Tectona grandis L. f. (2012)

  • Authors:
  • USP affiliated author: VASCONCELOS, TARCISIO SALES - ESALQ
  • School: ESALQ
  • Subject: BIOINFORMÁTICA
  • Keywords: Bioinformatics; Biossíntese de lignina; Formação da madeira; Lignin biosynthesis wood formation; Metabolismo dos fenilpropanóides; Phenylpropanoid metabolism; Tropical tree; Wood formation; Árvore tropical
  • Language: Português
  • Abstract: A árvore de teca (Tectona grandis L. f.), é uma das espécies tropicais de maior interesse econômico atualmente, devido as características singulares de sua madeira. Contudo, apesar da expansão dos povoamentos florestais desta espécie, pouco se conhece sobre sua biologia, especialmente referente aos estudos de genética e biotecnologia. Uma vez que tais estudos podem contribuir para a compreensão do crescimento da árvore e sua produção de madeira, este trabalho visou estudar a família gênica CAD, que codifica para a enzima Cinamil Álcool Desidrogenase, essencial para a catalização da reação de formação dos monolignóis, sendo estes os precursores finais da lignina, composto que participa no crescimento e formação de madeira das espécies florestais. Além deste gene, iniciou-se também a caracterização do gene PAL, que codifica para a enzima Fenilalanina Amônia-liase, a qual cataliza a desaminação da L-fenilalanina a ácido trans-cinâmico, sendo este passo uma transição entre o metabolismo primário e secundário vegetal, e também o primeiro passo na via biossintética dos fenilpropanóides, que participam da cascata de reações que conduz aos precursores finais da lignina. Com isto, os trabalhos realizados incluem o uso de ferramentas de bioinformática para a busca de domínios conservados entre espécies e síntese de primers passiveis de amplificar o gene CAD e o gene PAL em teca por PCR, extração de RNA total, e análise de cDNA por PCR semiquantitativa e PCR em tempo real. Assim, foram confeccionados primers degenerados e específicos que possibilitaram a amplificação do gene CAD, bem como primers degenerados para amplificação do gene PAL. Uma análise preliminar da expressão do gene CAD, mostrou maior expressão em tecidos vasculares de ramo, seguido pelos tecidos vasculares do tronco de árvores; aprofundando-se no lenho, o tecido que obteve a maiorexpressão foi o do cerne, seguido por alburno e medula. Também iniciou-se a caracterização da enzima PAL, analisando sua atividade e cinética em extratos protéicos de amostras de folhas e madeira, sendo possivel evidenciar maior atividade para extratos obtidos de amostras de folha, e posteriormente em tecidos vasculares de caule e ramo
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    • ABNT

      VASCONCELOS, Tarcisio Sales. Caracterização molecular, expressão gênica e atividade enzimática tecidoespecíficas das proteínas PAL e CAD durante a formação de madeira em Tectona grandis L. f. 2012. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) – Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2012. Disponível em: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/600d334c-4bbd-4323-b45a-89e8185f1c8f/TCCtarcilio.pdf. Acesso em: 29 abr. 2024.
    • APA

      Vasconcelos, T. S. (2012). Caracterização molecular, expressão gênica e atividade enzimática tecidoespecíficas das proteínas PAL e CAD durante a formação de madeira em Tectona grandis L. f. (Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação). Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/600d334c-4bbd-4323-b45a-89e8185f1c8f/TCCtarcilio.pdf
    • NLM

      Vasconcelos TS. Caracterização molecular, expressão gênica e atividade enzimática tecidoespecíficas das proteínas PAL e CAD durante a formação de madeira em Tectona grandis L. f. [Internet]. 2012 ;[citado 2024 abr. 29 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/600d334c-4bbd-4323-b45a-89e8185f1c8f/TCCtarcilio.pdf
    • Vancouver

      Vasconcelos TS. Caracterização molecular, expressão gênica e atividade enzimática tecidoespecíficas das proteínas PAL e CAD durante a formação de madeira em Tectona grandis L. f. [Internet]. 2012 ;[citado 2024 abr. 29 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/600d334c-4bbd-4323-b45a-89e8185f1c8f/TCCtarcilio.pdf

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