Interação do peptídeo TgPEP16 com membranas modelo (2021)
- Authors:
- USP affiliated author: HIGA, JESSICA SAYURI GOYA - FCF
- School: FCF
- Subjects: PEPTÍDEOS; ESPECTROSCOPIA
- Keywords: Peptídeos antimicrobianos; membranas-modelo; relação estrutura-função
- Language: Português
- Abstract: Os peptídeos antimicrobianos (AMPs) são de grande importância devido ao fato de funcionarem como uma defesa primária contra diversos microrganismos patogênicos. Essa característica mostra-se fundamental na área de FarmáciaBioquímica pois possibilita novas alternativas para tratamentos contra doenças causadas por esses microrganismos. A pesquisa focou no estudo da propriedade de interação do peptídeo com membranas modelo, permitindo a elucidação do mecanismo de ação do peptídeo e, além disso, experimentos foram realizados para caracterizar as propriedades biofísicas e biológicas desse novo peptídeo. Em suma, objetivou-se estudar as propriedades de interação do peptídeo TgPEP16 com membranas modelo para elucidação do mecanismo de ação desse peptídeo e dos fenômenos relevantes relacionados. Estes resultados serão comparados com os obtidos com o peptídeo BP100 para verificar se as alterações de aminoácidos da sequência do TgPEP16 são relevantes para a interação com modelos de membrana. Além disso, verificar se o peptídeo TgPEP16 tem ação antimicrobiana e compará-la com a do BP100. Os materiais utilizados foram os peptídeos TgPEP16 e BP100 e os lipídeos LPC, LPG, POPC e POPG. Os experimentos realizados foram a predição da estrutura secundária e modelagem molecular in silico e as técnicas experimentais utilizadas foram a fluorescência, dicroísmo circular, espalhamento de luz dinâmico, ensaios de vazamento de carboxifluoresceína, encapsulada em lipossomos e ensaios de concentração inibitória mínima. Os experimentos de estudo de ligação (fluorescência e DLS), determinação da estrutura secundária (CD) e análise da capacidade permeabilizante (ensaio de vazamento de carboxifluoresceína) exigiram a preparação prévia de filmes lipídicos para formação de micelas (formadas por LPC e LPG) ede bicamadas (formadas por POPC e POPG), ambos variando a proporção do conteúdo lipídico. Os resultados obtidos foram analisados com o auxílio do software Origin. No presente estudo, a modelagem molecular in silico permitiu observar que o peptídeo TgPEP16 se apresenta, em micelas e vesículas contendo lipídios com carga negativa, predominantemente em estrutura helicoidal, possuindo uma hélice anfipática. O experimento de fluorescência demonstrou que há ligação entre peptídeo e membranas, sendo que a ligação é dependente do conteúdo de lipídios com carga negativa e o experimento de dicroísmo circular demonstrou a mudança de estrutura randômica do peptídeo em solução para a estrutura helicoidal na presença das vesículas. O experimento de permeabilização demonstrou que o TgPEP16 foi incapaz de permeabilizar bicamadas formadas somente por lipídio neutro, mas conseguiu permeabilizar as bicamadas contendo lipídios com carga negativa, demonstrando a importância da carga. O TgPEP16 apresentou atividade antimicrobiana, sendo mais eficaz em bactérias Grampositiva do que Gram-negativas, fato explicado pela diferença de composição lipídica das membranas dessas bactérias. Por fim, concluiu-se que o peptídeo TgPEP16 apresenta mudança da conformação randômica para estrutura helicoidal na presença de membranas, apresentou interação com as mesmas, observada através de experimentos de ligação, de permeabilização, de espalhamento de luz dinâmico e tem atividade antimicrobiana. No entanto, ao ser comparado com o BP100, apresenta atividade menor em todos os experimentos realizados. Portanto, a alteração de aminoácidos, principalmente a troca de lisina e arginina, causou uma diminuição da atividade
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ABNT
HIGA, Jessica Sayuri Goya. Interação do peptídeo TgPEP16 com membranas modelo. 2021. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) – Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/bc835d31-6489-4536-9c6a-2d137b7b366a/3070018.pdf. Acesso em: 08 maio 2024. -
APA
Higa, J. S. G. (2021). Interação do peptídeo TgPEP16 com membranas modelo (Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação). Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/bc835d31-6489-4536-9c6a-2d137b7b366a/3070018.pdf -
NLM
Higa JSG. Interação do peptídeo TgPEP16 com membranas modelo [Internet]. 2021 ;[citado 2024 maio 08 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/bc835d31-6489-4536-9c6a-2d137b7b366a/3070018.pdf -
Vancouver
Higa JSG. Interação do peptídeo TgPEP16 com membranas modelo [Internet]. 2021 ;[citado 2024 maio 08 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/bc835d31-6489-4536-9c6a-2d137b7b366a/3070018.pdf
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